確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的福利一個(gè)重要部分是動(dòng)物與實(shí)驗(yàn)人員之間的正確互動(dòng)。對動(dòng)物的不正確處理會造成壓力，進(jìn)而影響研究成果。因此，實(shí)驗(yàn)人員正確處理動(dòng)物并了解不同技術(shù)對研究成果的影響非常重要。在本文中，我們將通過一個(gè)研究實(shí)例來探討不同技術(shù)的影響、利弊，以及這將如何影響您的研究。
不同處理技術(shù)的利弊
有許多不同的操作處理技術(shù)，但有三種在小鼠研究中最為普遍。它們分別是管道式處理、用手捧起和從尾根部拎起動(dòng)物。雖然抓尾巴是過去常用的方法，但有可能誘發(fā)嚙齒類動(dòng)物的焦慮。此外，使用抓尾巴的方法而不抓尾巴根部或沒有支撐小鼠的身體也會引起不適。
對于小鼠，可以使用管道處理法將其引導(dǎo)到塑料管道中。這種方法的主要優(yōu)點(diǎn)是管道可以放在籠子里。這使動(dòng)物熟悉該物體，對物體的習(xí)慣會減少壓力，操作更容易。管道式處理是動(dòng)物在不同環(huán)境間移動(dòng)的好方法。不過，在管道中檢查動(dòng)物或進(jìn)行干預(yù)比較困難。
與使用尾巴處理相比，用手捧起，讓動(dòng)物坐在或走過張開的手是一種可以減輕壓力的方法。在使用這種方法時(shí)，小鼠是不受約束的，這也是焦慮減少的原因。不過，這種方法需要小鼠熟悉操作者的雙手，這比讓動(dòng)物適應(yīng)管道更耗費(fèi)實(shí)驗(yàn)者的時(shí)間。
總之，雖然存在許多技術(shù)，但重要的是要根據(jù)您的具體研究需要權(quán)衡利弊。了解減少焦慮對研究的益處和影響，并報(bào)告使用的方法以提高研究的可重復(fù)性，這一點(diǎn)非常重要。想了解更多信息？最近，我們舉辦了一次網(wǎng)絡(luò)研討會 ，更深入地解釋了在曠場和高架十字迷宮中處理對焦慮測試的影響。您可以點(diǎn)擊此處觀看該網(wǎng)絡(luò)研討會。
給大鼠撓癢如何改善您的研究？
我們討論過某些處理技巧如何減輕焦慮。對于大鼠，還有另一種減輕壓力的方法，那就是給大鼠撓癢。給大鼠撓癢是由Jaak Panksepp博士于1999年提出的。這種方法可以模擬老鼠自然產(chǎn)生的打斗行為。大鼠在被其它大鼠或人類撓癢時(shí)還會發(fā)出許多積極的高音調(diào)聲音，這是一種積極情緒狀態(tài)的指標(biāo)。
多年來，大鼠撓癢一直被用來減輕大鼠在被實(shí)驗(yàn)者處理時(shí)的焦慮。通過撓癢，大鼠對觀察者的手的厭惡感會降低，在注射等程序后的壓力也會減少[1]。
來源：Gaskill實(shí)驗(yàn)室
如何給老鼠撓癢？
給大鼠撓癢的工作原理是首先進(jìn)行背部接觸（這也是老鼠大多數(shù)游戲打斗的開始方式），然后對大鼠用手鉗住。鉗住大鼠后，您要把大鼠抱起輕輕翻轉(zhuǎn)，讓它仰面朝天，并對他們的胸口處進(jìn)行撓癢。之后，松開大鼠，重復(fù)這個(gè)動(dòng)作。研究表明，只要在進(jìn)行標(biāo)記或注射等某些程序之前連續(xù)多天進(jìn)行撓癢，15 秒鐘的撓癢就足以讓老鼠從這項(xiàng)技術(shù)中獲益。值得注意的是，撓癢在動(dòng)物年幼且與人類接觸不多時(shí)效果好。撓癢可以在大鼠和人類之間建立聯(lián)系，如果大鼠已經(jīng)對人類產(chǎn)生了厭惡感，那么撓癢實(shí)際上可能會產(chǎn)生負(fù)面影響。
撓癢可能聽起來費(fèi)時(shí)費(fèi)力，但好處很多。被撓癢的老鼠不僅壓力較小，因此受應(yīng)激的影響也較小，而且也更容易處理。這反過來又節(jié)省了時(shí)間，改善了動(dòng)物的福利。如果您想了解更多有關(guān)給大鼠撓癢的知識或?qū)W習(xí)如何給大鼠撓癢，我建議您觀看梅根-拉福萊特博士（Dr. Megan LaFollette）的網(wǎng)絡(luò)研討會。她更深入地解釋了給大鼠撓癢的方法和注意事項(xiàng)。
在社會環(huán)境中測試嚙齒動(dòng)物
大鼠和小鼠是社會性動(dòng)物。幸運(yùn)的是，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室嚙齒類動(dòng)物在測試前后都會被社會化飼養(yǎng)。然而，我們發(fā)現(xiàn)越來越多的研究人員正在考慮在社會環(huán)境中進(jìn)行測試。使用軟件跟蹤多只動(dòng)物曾經(jīng)相當(dāng)復(fù)雜，因此，諾達(dá)思的EthoVision XT 18版本（動(dòng)物運(yùn)動(dòng)軌跡跟蹤系統(tǒng)的最新版本）包含一個(gè)改進(jìn)的社交互動(dòng)模塊。通過復(fù)雜的深度學(xué)習(xí)算法改進(jìn)了跟蹤功能，這樣就能減少錯(cuò)誤，并始終跟蹤到正確的動(dòng)物。這項(xiàng)新的創(chuàng)新不僅能讓研究人員測試小鼠的社交互動(dòng)，還能在社交環(huán)境中測試新奇物體或其他測試。EthoVision XT 18版本即將發(fā)布，敬請期待！
熟悉實(shí)驗(yàn)者對小鼠行為的影響
最近進(jìn)行了一項(xiàng)研究，研究了（除其他因素外）熟悉實(shí)驗(yàn)者對慢性疼痛癥狀的影響[2]。Segelcke等人將幾組小鼠暴露在不同的飼養(yǎng)環(huán)境和其他條件下。他們通過糞便皮質(zhì)酮水平測量了大鼠的壓力水平，并在行為和步態(tài)觀察中將其與小鼠的生理能力相關(guān)聯(lián)。
通過將小鼠暴露在戴手套的手上，實(shí)驗(yàn)者熟悉了它們。讓小鼠探索這只手，并爬到手上。每周兩次，每只小鼠每次5分鐘。研究人員在大部分操作中都使用了前面提到的用手捧起方法。不過，在將小鼠放入迷宮或圍欄時(shí)，則使用了從尾根部拎起。
通過使用動(dòng)物步態(tài)分析系統(tǒng)(CatWalk XT)進(jìn)行步態(tài)分析，研究人員發(fā)現(xiàn)，熟悉實(shí)驗(yàn)者的小鼠步態(tài)變化不太明顯。 此外，Segelcke 等人還發(fā)現(xiàn)，與不熟悉實(shí)驗(yàn)者的小鼠相比，熟悉實(shí)驗(yàn)者的小鼠會對某些行為測試的結(jié)果產(chǎn)生影響。熟悉的小鼠在進(jìn)行高架迷宮和懸尾試驗(yàn)等行為測試時(shí)壓力較小。
總之，正確的操作技術(shù)對于確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的福利非常重要。根據(jù)研究需要選擇合適的技術(shù)可以改善動(dòng)物福利，提高研究質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)者的處理和熟悉類型將對行為測試產(chǎn)生影響，因此在進(jìn)行行為研究時(shí)，考慮和記錄這些因素非常重要。
參考文獻(xiàn)
1. Cloutier, S.; LaFollette, M.R.; Gaskill, B.N.; Panksepp, J.; Newberry, R.C. Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats. JoVE J. Vis. Exp. 2018, e57190
2. Segelcke, D.; Talbot, S.R.; Palme, R.; La Porta, C.; Pogatzki-Zahn, E.; Bleich, A.; Tappe-Theodor, A. Experimenter Familiarization Is a Crucial Prerequisite for Assessing Behavioral Outcomes and Reduces Stress in Mice Not Only under Chronic Pain Conditions. Sci. Rep. 2023, 13, 2289
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